ELISA洗板技巧：少走90%实验弯路！

       尽管ELISA测定操作步骤简单，但有可能会影响测定结果的因素却比较多。不充分的洗涤会导致差异和高背景，从而带来不理想的结果！在做ELISA实验时，洗板有两种方法：【手工洗板】和【洗板机洗板】

【手工洗板】：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

【自动洗板机】：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

让我们一起看看洗板时操作要点有哪些呢：

1）洗涤需要20倍稀释，配置时用新鲜无污染的蒸馏水或去离子水现配现用。洗液若有结晶应待其溶解后配置。

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

2）垂直倒液，重复3-5次，不要手腕左右摇摆、旋转来倒液体。

3）倒液后将酶标板放在吸水纸上拍干。用干净的滤纸，不要用卫生纸。（细小粉尘或碎屑容易吸附到孔底，导致洗板不干净，结果偏高或偏低，重复孔的数值也会相差很大。

4）每孔加入350ul洗液，太多将溢出孔外污染相邻的孔。（特别是每次洗板的前两遍，若高浓度孔流传到低浓度孔或空白孔，其造成的交叉污染将无法洗掉，背景增高）

5）加入洗液浸泡1分钟，洗板5次。（洗板时间太短，洗涤效果不佳。）延长洗板时间和增加洗板次数可以使背景更干净。