科研问答:ELISA加样你知道多少?
上海轩泽康生物有限公司 / 2025-04-07 浏览量:
ELISA(酶联免疫吸附实验)加样是实验的关键步骤之一,它包含了加样本、加检测抗体、加底物、加终止液等步骤。操作不当可能导致结果偏差,因此要注意以下事项:
1)实验室使用的微量加样器应注意保养并定期校正。ELISA较为敏感,每孔加入液体量误差会导致最后读数差别,因此避免仪器带来误差。
2)加样前,溶液充分混匀,加样时不可90°向孔中滴加液体,否则会导致液体残留在吸头上,加样不准确。正确加样方法:45°吸头贴着孔壁和液面的交界处加入。
3)加样时速度不可过快,否则无法保证微量加样的准确性和均一性。
4)加样时避免液体溅出,如有样本溅出应用吸水纸轻轻拭干并作相应记录。
5)每次加样顺序一致,尤其底物、终止液顺序一致,保证每个孔显色时间相同。
通过规范操作和细节控制,可显著提高ELISA结果的准确性和重复性。若发生边缘效应(周边孔显色异常),建议使用封板膜密封,避免蒸发不均。