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样本是菌株,检测之前该如何操作呢?


上海轩泽康生物有限公司 / 2024-11-19 浏览量:

一. ELISA实验(酶联免疫吸附测定)中,样本是菌株,检测之前该怎么处理呢?别急,处理方案如下: 

1、 收集细菌悬液,1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。第一步的润洗不需要重悬)


2、加入适量的预冷PBS或细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细菌。通常6孔板一个孔的细菌量需要150~250μL PBS重悬。(PBS的ph为中性;菌一个6孔板,没有具体的量)


3、 将样品放入-20℃或-80℃,用高压细菌破碎机或者使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融几次,使细菌充分裂解。也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。(反复冻融处理,低温部分可以用液氮)


4、 4℃ 10000×g 离心10min,除去细菌碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。 


二. 打算把样本寄样送检测,需要怎么做?

我司订购任意一款ELISA试剂盒均提供免费来样检测服务,直接用离心管收集菌液+干冰+泡沫箱运输。送检前需活化,用液体培养基振荡15-30分钟,制成菌悬液(4℃冰箱保存建议在一天左右),样本收到后由实验专员进行处理。


菌液长期保存:可采用甘油管保存法。在菌液中加入一定比例,充分混匀后,放在-80℃冰箱里,不会影响活性。


举例:

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