豚鼠白细胞介素23（IL-23）

ELISA检测试剂盒使用说明书

                                                                       产品货号：XZK-15078

【摘要】：白细胞介素23是一种由IL12B（IL-12p40）亚单位（与IL12共享）和IL23A（IL-23p19）亚单位组成的异质二聚体细胞因子。IL-23的功能性受体（IL-23受体）已被确定，由IL-12R β1和IL-23R组成。Adnectin-2与IL-23结合并与IL-23/IL-23R竞争。IL-23R在结合IL-23的域中有一些单核苷酸多态性，因此在激活Th17方面可能存在差异。IL-23已被证明是Th17维持和扩张的关键细胞因子。IL-6和TGF-β激活Th17转录因子RORγt，使Th17极化。IL-23稳定RORγt，从而使Th17能够正常运作并释放其效应细胞因子，如IL-17、IL-21、IL-22和GM-CSF，这些细胞因子可介导对细胞外寄生虫（真菌和细菌）的保护并参与屏障免疫。

【产品用途】：本试剂盒仅供科研使用，定量检测细胞液、体液、组织、血清、血浆等标本中的IL-23。凡订购我司任意一款试剂盒均享受免费代测服务，欢迎咨询、订购！

常见样本处理及要求：

【血清】：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时 或 4℃过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或 将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【血浆】：用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在 采集后的 30 分钟内于 2-8℃ 1000×g 离心 15 分钟，取上 清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免 反复冻融。

【组织匀浆】：用预冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除 残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重 后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS（一般按 1:9 的重量体积比，比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS， 具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充 分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超 声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于 5000×g 离心 5~10 分钟，取上清检测。

【细胞培养物上清】：请 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检 测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

【样品保存】：样品收集后若在 1 周内进行检测的可保存于 4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃ （1 个月内检测），或-80℃（6 个月内检测），避免反复冻 融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进 行此项检测

 需要但未提供的材料及耗材：

1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热） 

2、精密移液器、吸头、加样槽 

3、蒸馏水或去离子水 

4、洗瓶或者自动洗板机 

5、37℃水浴锅或恒温箱 

6、EP 管 

7、无粉一次性乳胶手套 

【储存条件及有效期】：

 1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期 6 个月。 

2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自 封袋，并将全部试剂放回 2-8℃冰箱。 

注意：试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用 后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1 个月内使用完毕。产品过期 时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

豚鼠白细胞介素23（IL-23）ELISA检测试剂盒组成及其配置（检测范围请参考说明书）

实验注意事项：

1）   收到试剂盒后，为保证检测效果，需要根据说明书中保存条件正确储存。除非特别注明，试剂盒大多再2~8℃条件下储存。

2）   在实验进行，请确认包装中的试剂盒成分与说明书一致，再进行后续操作。

3）  溶解标准品过程中，注意标准品是否受潮，过程中要避免产生泡沫。

4）  为了避免交叉污染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需呀更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。

5）   每次孵育时，正确使用封板胶条纸可保证结果的准确性。

6）   正确洗板有助于实验结果的稳定性。

7）   TMB显色底物在上板应为无色，请避光保存。加入孔板后，将由无色变成不同程度的蓝色。

8）  终止液上板顺序需与底物上板顺序一致，加入终止液，溶液颜色由蓝色变为黄色。如果出现绿色，即表明终止液与底物未混匀，请充分混匀。